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金黄色葡萄球菌检查法
作者:  转载自:  发布日期:2014-7-25

一、概述

      葡萄球菌属因该属细菌通常排列成不规则的葡萄串状得名。为革兰阳性的兼性厌氧球菌。多数不致病,少数可引起人或动物化脓性感染,为人兽共患病原菌。其中致病性最强、最常见和多发的为金黄色葡萄球菌,可致多种化脓性感染,如创伤、疖、痈、脓肿、心内膜炎、败血症、骨髓炎、肺炎、关节炎、食物中毒等,还可引起烫伤样皮肤综合症和中毒性休克综合症。

      葡萄球菌广泛分布于自然界以及人的体表和与外界相通的腔道内,其主要来源为人和动物,在人和家畜寄生部位以鼻腔为主,其次是咽喉、皮肤、皮脂腺和其他与外界相通的腔道中,在空气、尘埃、水、食物、粪便等物质中均可被检出。如金黄色葡萄球菌的产肠毒素菌株可在食品中大量繁殖,产生肠毒素引起人类急性食物中毒。

二、葡萄球菌属的特性及常见菌的鉴别

      葡萄球菌菌体成球型,直径0.5~1.5un,平均0.8um。致病性葡萄球菌的菌体较非致病性葡萄球菌的菌体小。革兰染色阳性,衰老或死亡后可转为阴性。在液体培养基或脓汁取样涂片呈单个、成双或短链排列,在固体培养基上取菌落涂片成簇排列呈葡萄串状。无鞭毛和芽孢,少数某些菌株能形成芽孢。在普通固体培养基上呈不同颜色的不透明、圆形凸起菌落。

      葡萄球菌属是无芽孢细菌中抵抗力最强的细菌,耐干燥,对多种抗生素和消毒剂不敏感。生化反应活泼,能分解多种糖类、蛋白质,触酶阳性。

三、金黄色葡萄球菌的生物学特性

1.形态特征

      金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)菌体呈球形或略呈椭圆形,菌体较小,直径0.5~1.5um,平均0.8um,菌体大小均匀一致。

      在液体培养基或脓汁中,菌体呈一个平面分裂而呈现单个、成双或短链状排列;在固体培养基中,由于菌体向多个平面不规则分裂,而成簇排列呈葡萄串状。无鞭毛和芽孢,除及少数菌株外一般不形成荚膜。

      金黄色葡萄球菌菌体易被碱性染料着色,因此革兰染色呈阳性,但已衰老、死亡的菌体由于核酸含量降低等原因、被中性粒细胞等吞噬后的菌体碱性染色就不易着色了,常呈革兰染色阴性。

2.培养特性

      金黄色葡萄球菌对生长的营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度为37℃,最适生长PH值为7.4.该菌耐盐性强,在含有10%~15%氯化钠的培养基中仍可生长繁殖,可用于金黄色葡萄球菌的分离。

      金黄色葡萄球菌在营养琼脂培养基平板上,经37℃培养24~48小时后,呈直径1~2mm的金黄色、圆形、凸起的菌落,菌落表面光滑、湿润、边缘整齐,不透明。由于金黄色葡萄球菌产生的金黄色色素为脂溶性色素,不溶于水,因此仅菌落着色,培养基不着色。

      金黄色葡萄球菌在营养肉汤培养基中经37℃培养18~24小时后,呈均匀浑浊生长,繁殖较多时易产生沉淀,沉淀易被摇散。

3.生化反应

      金黄色葡萄球菌的生化活性很强,能分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇等多种糖类,乳酸为其代谢终产物,但不产生气体。

      该菌甲基红反应和V-P试验为阳性,但靛基质试验为阴性。能够分解尿素产氨、还原硝酸盐和液化明胶。

      金黄色葡萄球菌可产生血浆凝固酶、耐热DNA酶、精氨酸双解酶、大多数菌株还可产生磷酸酶和过氧化氢酶(触酶)。在金黄色葡萄球菌鉴别中血浆凝固酶阳性和触酶实验阳性为重要指标。

      该菌对大多数抗生素和消毒剂不敏感,在药敏实验中常表现为新生霉素等多种抗生素不敏感,但其生长可被多粘菌素抑制。

四、金黄色葡萄球菌常规检查法

      供试品 →供试液 →增菌(营养肉汤或亚碲酸钠肉汤)→卵黄氯化钠琼脂平板或甘露醇氯化钠琼脂平板,若阴性,则报告之金黄色葡萄球菌未检出。若阳性,则进行→镜检→血浆凝固酶试验→报告。

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